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技術(shù)文章

給培養(yǎng)瓶里面的細胞換液需要怎么做

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  為細胞換液時,要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入,而不是直接加到細胞中,以免損傷細胞,當(dāng)培養(yǎng)的細胞株較為脆弱時尤其需要注意。
  使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時,每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
  在培養(yǎng)細胞的過程中,換液是一項非常常規(guī)操作,它主要是為了清除細胞在生長過程中產(chǎn)生的各種代謝廢物,補充新鮮的培養(yǎng)基,促進細胞生長。那么,如何更換細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的溶液呢?
  1、將器材放入超凈臺,打開紫外照射滅菌,若是培養(yǎng)的細胞對溫度比較敏感,可以將含血清的培養(yǎng)基瓶放入37℃的水浴箱使得培養(yǎng)基溫度在37℃,再轉(zhuǎn)移到超凈臺紫外滅菌。另外,細胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時左右。
  2、從培養(yǎng)箱取出細胞培養(yǎng)瓶,用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒,轉(zhuǎn)移到超凈臺,打開蓋子,輕輕吸出舊的培養(yǎng)液,可用移液器加入新鮮含血清培養(yǎng)基,注意一定不要從細胞貼壁面加入培養(yǎng)基,應(yīng)從側(cè)壁加,動作輕柔,以免沖落細胞。
  3、加好培養(yǎng)基后,蓋上蓋子,在瓶子上做標(biāo)記,注明換液時間,細胞種類,操作人員等信息。
  4、放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴瓶子表面,然后應(yīng)記得整理操作臺,用酒精擦拭超凈臺臺面,清理廢液和垃圾。
  在進行換液操作時,全程注意無菌,操作人員要穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩,手接觸到細胞培養(yǎng)瓶瓶口時一定要小心,避免造成污染。

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